光反应性活性氧（ROS）测定试验设备

药品监督管理局组织起草了《化妆品毒理学试验方法样品前处理通则》等19项制修订项目并形成相应检验方法，经化妆品标准专家委员会全体会议审议通过，于2024年3月21日予以发布。其中《化妆品毒理学试验方法样品前处理通则》的 <光反应性活性氧（ROS）测定试验方法>为新增检验方法，纳入《化妆品安全技术规范（2015年版）》，自2024年12月1日起实施。

光反应性活性氧（ROS）测定试验方法

ROS测定的试验原理：

一些具有光反应性的化学物质暴露于紫外线时，吸收某一波长光子，诱导发色团激发，激发能量转移到氧分子上，发生光化学反应，产生活性氧（包括单线态氧SO和超氧阴离子SA），活性氧是光毒性反应中的重要中间物质。单线态氧和咪唑反应生成的过氧化物中间体对N,N-二甲基-4-亚硝基苯胺（RNO）具有漂白作用，使其在440 nm下的吸光度降低。超氧阴离子与氯化硝基四氮唑蓝（NBT）反应生成NBT+，其在560 nm波长下具有光吸收。 本试验方法通过分光光度法测定化学物质经紫外线照射后对RNO在440 nm下吸光度的减少及对NBT+在560 nm下吸光度的增加来判断该化学物质是否具有光反应性。

光反应性活性氧测定试验方法对太阳光模拟器的要求：

1.选择合适的光源用于提供紫外线和可见光的照射，通过滤光片减少波长小于290 nm的UVC，使光源尽量接近室外日光。推荐的测试条件如下：

a) 配备滤光片的太阳模拟器（减少紫外线波长<290 nm）

— 辐照度：1.8 mW/cm2至2.2 mW/cm2，照射1小时（例如，LUYOR-3450的指标设置值为2.1mW/cm2），

— UVA光照剂量：6.5 J/cm2至7.9 J/cm2。

b) 配备滤光片的太阳模拟器（减少紫外线波长<300 nm）

— 辐照度：3.0 mW/cm2至5.0 mW/cm2，照射1小时。

— UVA光照剂量：11 J/cm2至18 J/cm2（见附录B）。

 2.测试条件根据实际选择合适具体条件。

3.ROS的产生受温度影响，太阳光模拟器应配备温度控制装置，光照期间温度在20℃~29℃。

利用LUYOR-3450进行光反应性活性氧（ROS）测定的优势：

1.和传统的高压汞灯的太阳光模拟器相比,LUYOR-3450采用的是低压汞灯光源，没有高热量产生。

2.采用自滤色紫外线灯管，没有290nm以下的紫外线输出。

3.内置高精度紫外线传感器，能够实时监测紫外线强度。

4.微处理器控制紫外辐照能量，达到预设的辐照剂量自动停止运行。

5.双风扇冷却，确保辐照腔保持室温状态。