实验室以及野外如何检测荧光蛋白GFP RFP

  对蛋白亚细胞定位的认知可能表明，蛋白可能在许多细胞进程中发挥作用。如果与下面所列的其中一种细胞器特异性试剂共定位，那么可确认目的蛋白的亚细胞位置。虽然这些细胞器标记物可用作强大的免疫荧光工具，但它们还可用作碎裂细胞裂解物的蛋白质印迹对照。

这些蛋白的表达可能在不同细胞和组织中有所不同。

  荧光蛋白的发光原理在于其发色基团经一定波长的光（激发光）照射后被激活，并将能量以光能形式释放，这时我们就能在荧光显微镜下看到日思夜想的荧光色啦！   

但由于能量不能全以光的形式辐射出来，所以荧光蛋白的发射光（荧光）的波长比激发光长。

那么我们是怎么将荧光蛋白分类的呢？通常，人们按发射波长来分类并定义其颜色（下图）。

RFPs（红色荧光蛋白）： 

mCherry具有优异光稳定性，通用红色单体（但融合表达时有较弱的齐聚效应）

tdTomato具有mCherry相同的光稳定性，亮度强，是追踪表达水平的理想选择，但为串联二聚体，可以在融合标签大小不干扰蛋白质功能的情况下使用

mStrawberry信号亮的红色单体，但光稳定性要弱于mCherry

DsRed是细胞毒性小的RFP

mApple在蛋白的融合表达中是mCherry不错的替代物，但其光稳定性要远弱于mCherry

mKate2从参数方面考量是综合亮度、光稳定性和齐聚性的RFP。

OFPs（橙色荧光蛋白）：

mOrange橙色单体

YFPs（黄色荧光蛋白）：

mVenus是亮度*的黄色单体

GFPs（绿色荧光蛋白）：

EGFP

BFPs（蓝色荧光蛋白）：

mTagBFP2稳定，成熟快、亮度极亮的蓝色单体

上面是通用一些荧光蛋白参数，再好的载体也需要找对合适的光源，光源的选择对于载体信号的激发也是*的，美国LUYOR公司实验室仪器事业部致力于研究和开发荧光观测装备，其产品系列有 LUYOR-3415RG双荧光蛋白观测灯，LUYOR-3430、LUYOR-3260单荧光蛋白观测手电筒。荧光是各种各样细胞生物学、神经系统学及其他领域研究中的一种强大和广泛使用的工具。LUYOR的LUYOR-3415RG和LUYOR-3430、LUYOR-3260除了可用于筛选转基因生物外，还可以用于样本的预筛选、辅助解剖、用于珊瑚研究等

LUYOR-3415RG双荧光蛋白观察灯的用途：

用于检测、筛选转绿色荧光蛋白（GFP）和红色荧光蛋白（DsRed）基因的植物、动物及微生物，如水稻、玉米、斑马鱼、小鼠、细：菌、真菌等等...

LUYOR-3415RG双荧光蛋白观察灯的产品优势：

1． 大功率输出，无需暗室，也可轻松激发荧光。

2．检测效率高，黑暗中检测一目了然

3．LED寿命50000h，且系统稳定，可长时间使用 

4．直接检测，而无需用底物显色，所以安全，对被检测对象无伤害

激发光源激发出绿色荧光时，用黄色滤光镜观测，可检测含绿色荧光蛋白（GFP）的生物；激发光源激发红色荧光时，用红色滤光镜观测，可检测含红色荧光蛋白（DsRed）的生物。

注：

1. LUOYR-3415R用于观测绿色荧光蛋白

GFP：绿色荧光；  fluorescein荧光素

2. LUOYR-3415C用于观测黄色荧光蛋白

YFP：黄色荧光蛋白；  Venus：金色；  Lucifer Yellow：荧光黄

3. LUOYR-3415G用于观测红色荧光蛋白

DsRed：红色荧光蛋白；   TdTomato：番茄红

4. LUOYR-3415V用于观测紫色荧光蛋白

CFP：青色荧光蛋白；   BFP：碱性胎儿蛋白

5. LUOYR-3415U用于观测：

DAPI：蓝色荧光

LUYOR-3415荧光蛋白激发光源的物理技术参数：

波长：可任意选择2种波长：365nm，400nm， 450nm， 485nm，520nm

质量：净重0.9kg，毛重：4kg，尺寸：180x200mm（长x高），头部直径120mm。

功率：单波长15w，总功率27w。

输入电压：交流100-260v，频率50/60Hz。

包装箱尺寸：400x300x150mm（长x宽x高）

距灯150mm处照射直径为180mm。

LUYOR-3415荧光蛋白激发光源的标准配置：

luv-50观察眼镜，luv-30观察眼镜，说明书，合格证，保修卡，铝合金手提箱。

LUYOR-3415荧光蛋白激发光源的主要产品应用：

检测转绿色荧光蛋白（GFP）基因、红色荧光蛋白（DsRed）基因植物：水稻、小麦、玉米、大豆、棉花、拟南芥

检测转GFP、DsRed基因动物：小鼠、兔子、猴子等；

检测转GFP、DsRed基因微生物：细菌、真菌、酵母等；

检测GFP、DsRed基因组织特异性表达；